63期赛马会提供四肖中特

网站首页|在线留言|联系我们

欢迎来到济宁中诺化工仪器有限公司

济宁中诺化工仪器有限公司

全国服务热线:0537-2162628
济宁中诺化工仪器有限公司

联系我们

济宁中诺化工仪器有限公司
济宁中诺化工仪器有限公司

电话:0537-2162628

传真:0537-2162628

QQ:1060765266

E-MAIL:[email protected]

销售部联系方式:

0537-2162628

售后联系方式:

手机:18653796918

地址:济宁市中区三里营路1-17号

您现在位置:首页 » 技术文章
色谱保留时间漂移的故障排除
发布时间:2010-07-12   点击次数:2446次
 

经营:气体发生器,色谱仪维修,气相色谱仪,液相色谱仪,色谱柱

保留时间不重现有两种不同的情况:既保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化,而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如,保留时间的漂移往往由柱老化引起?#27426;?#26609;老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上,保留时间漂移的多半原因是不同机理的色谱柱老化,如固定相流失(例如通过水解),色谱柱污染(由样品或流动相所致)等。保留时间漂移的?#38050;謟ui常见的原因如下: 
  一色谱柱平衡 
  如果我们观察到保留时间漂移,首先应考虑色谱柱是否已用流动相完全平衡。通常平衡需要10-20个柱体积的流动相,但如果在流动相中加入少量添加剂(如离子对试剂)则需要相?#32972;?#30340;时间来平衡色谱柱。 
  流动相污染?#37096;?#33021;是原因之一。溶于流动相中的少量污染物可能慢慢富集到色谱柱上,从而造成保留时间的漂移。应注意:水是很容易污染的流动相成分。 
  二固定相稳定性 
  固定相的稳定性都是有限的,即使在推荐的PH范围内使用,固定相?#19981;?#24930;慢水解。例如,硅胶基质在pH4时水解稳定性zui好。水解速度与流动相类型和配体有关。双官能?#25490;?#20307;和三官能?#25490;?#20307;比单官能?#25490;?#20307;的键合相要稳定;长链键合相比短链键合相稳定;烷基键合相比氰基键合相稳定的多。 
  经常清洗色谱柱亦会加速色谱柱固定相的水解。其他硅胶基质键合相在水溶液环境中?#37096;?#20197;发生水解,如氨基键合相等。 
  三色谱柱污染 
  保留时间漂移的另一个常见原因是色谱柱污染。HPLC色谱柱是非常有效的吸附性过滤器,它可以过滤并吸附流动相携带的任何物质。污染源可以是:流动相本身,流动相容器,连接管、泵、进样器和仪器密封垫,以及样品等。通常通过实验可判断污染的来源。 
  样品中如果存在色谱柱上保留很强的组分,就可能是使保留时间漂移的潜在根源。这些根源通常是样品基质。如?#21495;?#33647;中的赋形剂,生化样品(如血清)中的蛋白及类脂类化合物,食品样品中的淀粉,环境水样中的腐殖酸等。通常样品中的强保留组分具有?#32454;?#30340;分子量,在此情况下,保留时间漂移的同时或其后会有反压的增加。可以通过使用固相提取(SPE)等样品前处理方法来去除样品基质的影响。 
  避免色谱柱污染zui简单的方法是防患于未然。相比之下,找到问题的所在并设计有效的清洗步骤以去除污染物要困难的多。通常使用在给定色谱条件下的强溶剂,但并非所有污染物都可以在流动相中溶解。如THF可去除反相色谱柱中的许多污染物,但蛋白在THF中就不能溶解。DMSO常常用于去除反相色谱柱中的蛋白。 
  使用保护柱是个非常有效的方法。反冲色谱柱仅是不得已时采用的办法。 
  四流动相组成 
  流动相组成的缓慢变化也是保留时间漂移的常见原因。如流动相中易挥发组分的挥发及循环使用流动相等。 
  五疏水坍塌 
  当小孔径、端基封口良好的反相填料色谱柱使用接近100%的水为流动相?#20445;?#26377;时会发生分离突然丧失?#27688;?#20998;析物质保留明显降低或完全不保留的现象,这就是疏水坍塌。此现象是由流动相不浸润固定相表面而致。挽救的办法实现用含大量有机组分的流动相浸润固定相,再用高水含量的流动。

分享到:

返回列表 | 返回顶部
手机
18653796918
电话
0537-2162628
点击这里给我发消息
 
63期赛马会提供四肖中特
快速赛车骗局 山东11选5中奖 足球任选9场推荐 中国彩票集团总资产 安徽快3二同号单选遗漏数据 香港六合彩-雷锋版 梭哈每轮发牌顺序 重庆时时彩3期计划表 免费时时彩推荐软件 云南11选5软件 澳洲幸运5是哪里开奖 河南快3怎么玩 手机豪门棋牌游戏下载 重庆幸运农场走势图78 广西快3冷号回补